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AAT Bioquest 品牌  常用转染试剂 无需溶解  直接使用 货号60020图1AAT Bioquest 品牌  常用转染试剂 无需溶解  直接使用 货号60020图2
详情信息
级别 : 超纯、高纯 含量 : 95%
产品规格 : 500ul 品牌 : AAT Bioquest
用途范围 : AAT Bioquest生产的荧光染料 特色服务 : 免费技术咨询 顺丰包邮

Transfectamine 5000转染试剂






产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞进行转染

2.准备Transfectamine 5000-DNA混合物

3.将Transfectamine 5000-DNA混合物添加到细胞培养物中

4.过夜培养

5.用适当的方法分析转染效率

 

溶液制备

1.工作溶液配制

1.1将2.5ug DNA与200uL无血清培养基混合。

1.2在步骤1中添加7.5 uL Transfectamine 5000。

1.3充分混合并在室温下孵育20分钟。 注意:Transfectamine 5000和DNA的比例需要针对不同的细胞系进行优化,通常:Transfectamine 5000转染试剂(uL)与DNA(ug)的比例= 3-5 uL至1ug

6孔板与10cm板样品方案

组成6孔板(每孔)10厘米板
新鲜培养基2ml6ml
质粒~2.5ug7.5-10ug
无血清培养基200ul600ul
Transfectamine 5000转染试剂7.5ul~22.5ul

 

样品示例及操作

1.细胞培养准备

1.1转染时将细胞培养至约90%融合。

1.2转染前用新鲜的生长培养基替换。 例如,对于6孔板,每孔用2 mL培养基替换,对于10 cm板,用6 mL培养基替换。

2.转染方案

将Transfectamine 5000 -DNA混合物添加至培养板并培养过夜。 注意:重组蛋白 早可在转染后16小时开始检测。转染后72〜96小时可观察到 表达水平。

图1.使用Transfectamine 5000,Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000试剂在HeLa细胞中的转染效率比较。 每种试剂用于以96孔格式转染HeLa细胞,转染后24小时分析GFP表达。 与Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000试剂相比,Transfectamine 5000转染试剂可提供更高的GFP转染效率。

 



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